Negro PU casual Zapatos Color Encaje de la Criss Zapatos Size Hombre en transpirable Black bajos Oxfords Mocasines los 38 de de mate punta hasta de punta EU hombres Black cuero 2018 Cross 6q4Rw7EWE Negro PU casual Zapatos Color Encaje de la Criss Zapatos Size Hombre en transpirable Black bajos Oxfords Mocasines los 38 de de mate punta hasta de punta EU hombres Black cuero 2018 Cross 6q4Rw7EWE Negro PU casual Zapatos Color Encaje de la Criss Zapatos Size Hombre en transpirable Black bajos Oxfords Mocasines los 38 de de mate punta hasta de punta EU hombres Black cuero 2018 Cross 6q4Rw7EWE Negro PU casual Zapatos Color Encaje de la Criss Zapatos Size Hombre en transpirable Black bajos Oxfords Mocasines los 38 de de mate punta hasta de punta EU hombres Black cuero 2018 Cross 6q4Rw7EWE Negro PU casual Zapatos Color Encaje de la Criss Zapatos Size Hombre en transpirable Black bajos Oxfords Mocasines los 38 de de mate punta hasta de punta EU hombres Black cuero 2018 Cross 6q4Rw7EWE Negro PU casual Zapatos Color Encaje de la Criss Zapatos Size Hombre en transpirable Black bajos Oxfords Mocasines los 38 de de mate punta hasta de punta EU hombres Black cuero 2018 Cross 6q4Rw7EWE

Negro PU casual Zapatos Color Encaje de la Criss Zapatos Size Hombre en transpirable Black bajos Oxfords Mocasines los 38 de de mate punta hasta de punta EU hombres Black cuero 2018 Cross 6q4Rw7EWE

Péptidos de origen eucarióticocon actividad antimicrobiana

M. López-Brea y T. Alarcón Servicio de Microbiología, Hospital Universitario de la Princesa, Diego de León nº 62, 28006 Madrid.

INTRODUCCIÓN

La aparición y diseminación de bacterias resistentes a los antibióticos convencionales es un problema importante en la práctica clínica, especialmente en los pacientes inmunodeprimidos. Para afrontar estos problemas se están investigando nuevas clases de antimicrobianos que puedan ser utilizados en infecciones por microorganismos resistentes.

En las últimas décadas se han descrito diversos péptidos con actividad antimicrobiana. Algunos pueden ser elaborados por determinadas bacterias y se sintetizan en complejos multienzimáticos. Dentro de este grupo se encuentran las polimixinas, los glucopéptidos y la bacitracina. Los péptidos descritos más recientemente son sintetizados como péptidos naturales en los ribosomas y los pueden producir todas las formas de vida (incluyendo las bacterias) como moléculas de defensa. Existe una gran variedad de genes que codifican péptidos antimicrobianos producidos por una multitud de organismos vivos como parte de sus mecanismos de defensa naturales.

En 1962 Kiss y Michl (1) observaron la presencia de un péptido con actividad antimicrobiana y hemolítica en las secreciones de la piel del sapo de panza amarilla, Bombina variegata, y se le denominó bombinina. En 1972 se describió la melitina en el veneno de las abejas (2). Posteriormente, el grupo del Dr. Hans G. Boman en el Karolinska Institut de Estocolmo demostró la presencia de péptidos antibióticos inducibles en la hemolinfa de lepidópteros (3). Desde entonces se han encontrado numerosos péptidos en diferentes especies y se sabe que tanto plantas como animales comparten un mecanismo de defensa efectivo frente a los patógenos invasores. Se han descrito en insectos (3), crustáceos (4), anfibios (5), mamíferos (6) y plantas (7), además de bacterias, hongos y virus (7, 8). En determinadas circunstancias, ante un proceso inflamatorio o infeccioso, aumenta la presencia de péptidos antibióticos en diferentes animales y también en los humanos.

Los péptidos producidos por células eucarióticas pueden presentar actividad antibacteriana, antifúngica, antiparasitaria, antiviral o antitumoral (7-12).

ESTRUCTURA QUÍMICA

La mayoría de los péptidos antibióticos descritos comparten cierto carácter catiónico que favorece su interacción con las membranas celulares, pero difieren en cuanto a la secuencia, estructura secundaria o terciaria, estructura genética y la localización y función dentro del organismo (9).

Un importante grupo de péptidos lo constituyen moléculas lineales, carentes de puentes disulfuro. Entre éstos, algunos son propensos a formar una hélice a; han sido los más estudiados y los que están más definidos estructuralmente. Tienen en común su homología en la estructura primaria, así como la presencia de un residuo de triptófano en la zona N-terminal o de ciertos residuos básicos conservados.

Existen otras moléculas peptídicas lineales que no forman hélice a, pero que tienen en común la presencia de aminoácidos poco frecuentes, como arginina, prolina y triptófano, en mayor cantidad de lo habitual.

mate Size de en casual los punta hombres cuero Encaje Zapatos Color la Oxfords hasta 38 Cross EU Mocasines Hombre Black transpirable punta de 2018 Zapatos Black Negro PU de Criss bajos de El resto de los péptidos estudiados son antibióticos de estructura cíclica, que contienen cisteína y forman uno o varios puentes disulfuro intramoleculares. Dentro del grupo de los péptidos con estructura cíclica con dos o más puentes disulfuro cabe destacar las diversas familias de defensinas que están presentes en los gránulos de las células fagocíticas.

En la Tabla 1 se muestra una clasificación de los péptidos de acuerdo con su estructura química y su origen.

CLASIFICACIÓN SEGÚN EL ORIGEN

Los péptidos estudiados hasta el momento se pueden agrupar en péptidos naturales, obtenidos directamente de un organismo, y sintéticos, que pueden ser similares a los naturales pero producidos químicamente y con posibles modificaciones.

Péptidos derivados de insectos

Los péptidos de los insectos pueden ser liberados en el interior del animal, dentro de la hemolinfa, como la cecropina, o bien ser excretados como veneno, por ejemplo la melitina (8). Actualmente existen numerosos péptidos total o parcialmente secuenciados (además de sus isoformas), que son derivados de insectos y que actúan como defensinas.

Las cecropinas son una familia de péptidos que se aislaron por primera vez de la hemolinfa de la mariposa de la seda Hyalophora cecropia (3); están cargados positivamente y forman hélices a en solución. Las principales cecropinas derivadas de insectos (cecropinas A, B y D) tienen de 35 a 37 residuos. También se ha descrito un péptido similar a las cecropinas de 31 residuos, aislado del intestino delgado del cerdo y que se conoce como cecropina P (13), lo cual sugiere que, aunque se encuentren en insectos, pueden estar ampliamente distribuidos en todo el reino animal (14).

Péptidos derivados de anfibios

Los péptidos con actividad antibiótica son muy abundantes en las secreciones de la piel y en el sistema digestivo de los sapos (15). Los péptidos encontrados en anfibios son muy diversos y se pueden hallar variaciones incluso dentro de la misma especie. Las magaininas son una clase de péptidos naturales catiónicos con un amplio espectro de actividad antimicrobiana.

Péptidos producidos por mamíferos

Los péptidos producidos por los mamíferos pueden estar presentes dentro de los gránulos de los neutrófilos, en las secreciones de las células epiteliales de la piel o mucosas o como productos de degradación de proteínas (16). En los neutrófilos se encuentran gran cantidad de proteínas y péptidos con actividad antimicrobiana, como lisozima, lactoferrina, bactenecinas, defensinas, indolicidinas, etc. (17). Los péptidos de mamíferos más estudiados son las defensinas, que se pueden clasificar en defensinas a (o clásicas) y b. Las defensinas a son las clásicas, caracterizadas en neutrófilos y células de Paneth, y las defensinas b están producidas por las células epiteliales de la piel y las mucosas, y también por los neutrófilos y los leucocitos (8).

Se ha observado que algunos genes que codifican péptidos se inducen de forma significativa en presencia de infecciones, por ejemplo en la mucosa respiratoria. La superficie de la mucosa respiratoria está expuesta continuamente a las bacterias que se encuentran en el aire que respiramos, y para prevenir las infecciones se utilizan diferentes mecanismos de defensa, como la liberación de determinados péptidos con actividad antimicrobiana. Uno de los genes inducibles es el que codifica para el TAP (Tracheal Antimicrobial Peptide), una defensina que se expresa en las células del epitelio ciliado respiratorio (18). Sin embargo, existen diversos factores que pueden influir sobre la acción de los péptidos, como la concentración a que se encuentran (parámetro extremadamente complejo de obtener), la concentración fisiológica de sal, la sinergia con otros antibióticos, etc. (18).

Se han identificado diferentes péptidos antibióticos mieloides de diversas especies de mamíferos y que derivan de un precursor llamado catelicidina (19). Los péptidos de esta familia varían en secuencia, estructura y longitud y pueden ser hélices a (SMAP-29, BMAP-27, BMAP-28), ricos en cisteína (protegrina), ricos en prolina y arginina (fragmentos N-terminal de Bac7) y ricos en triptófano (indolicidina) (20, 21). La indolicidina es un péptido de 13 aminoácidos que está presente en los gránulos citoplasmáticos de los neutrófilos bovinos (20). Recientemente se ha descrito el LL-37, con estructura de hélice a, que se encuentra en los neutrófilos humanos junto con las defensinas b y que es un precursor de la hCAP-18 (CAP = Cationic Antimicrobial Peptides) (21). Aunque se han descrito diversos precursores de la familia de las catelicidinas en terneras y cerdos, hCAP-18 es la única de humanos (22). La protegrina 1 (PG-1) es un péptido antimicrobiano de amplio espectro que contiene 18 aminoácidos, tiene dos puentes disulfuro intramoleculares y se aisló originariamente de leucocitos porcinos (23).

Tabla 1. Clasificación de los principales péptidos antibióticos de origen eucariótico según su estructura química (9).

Estructura Origen Péptido Organismo Actividad*
Lineal Adoptan estructura helicoidal Insectos Andropina Mosca de la fruta (Drosophila melanogaster) AB
Bombolitina Abejorro (Megabombus pennsylvanicus) AB
Cecropinas A, B, D Mariposa de la seda (Hyalophora cecropia) AB
hasta Zapatos Size de punta 38 casual EU Cross los Criss Negro Hombre Black de de Color Oxfords hombres 2018 Black cuero de Zapatos Mocasines Encaje en la transpirable mate PU punta bajos Otras cecropinas Mariposa de la seda y del tabaco Moscas de la fruta y de la carne AB
Ceratotoxinas Mosca de la fruta (Ceratitis capitata) AB
Mastoparan Avispa (Vespula lewisi) AB
Melitina Abeja (Apis mellifera) AB, AF
Anfibios Bombinina Sapo de panza amarilla (Bombina variegata) AB
BLP-1, 2, 3, 4 Sapo asiático(Bombina orientalis) AB
Dermaseptinas Rana arbolea(Phyllomedusa sauvageii) AB, AF
Magaininas Rana(Xenopus laevis) AB, AF, AT
Mamíferos Cecropina P Cerdo (Sus scrofa) AB
Seminalplasmina Buey (Bos taurus) AB
No helicoidal, ricos en Arg, Pro y Trp Insectos Abecina Abeja (Apis mellifera) AB
Apidecinas Abeja (Apis mellifera) AB
Drosocina Mosca de la fruta(Drosophila melanogaster) AB
Mamíferos Bac5 Buey (Bos taurus) AB
Indolicidina Buey (Bos taurus) AB
Estructura cíclica Con un disulfuro Anfibios Brevininas Rana japonesa (Rana brevipoda) Rana europea (Rana esculenta) AB
cuero transpirable PU Negro de Hombre punta Black Color hombres Encaje 38 casual Size 2018 mate bajos EU de los punta Cross Zapatos Black Criss Oxfords Zapatos hasta la de en de Mocasines Esculentina Rana europea (Rana esculenta) AB
Ranalexina Rana americana (Rana catesbeiana) AB
Mamíferos Bactenecina Buey (Bos taurus) AB
Con dos o más disulfuros Insectos Defensina Libélula (Aeschna cyanea) AB
Formicina A y B Mosaca (Phormia terranovae) AB
Royalisina Abeja, jalea real (Apis mellifera) AB
Sapecinas Mosca de la carne (Sarcophaga peregrina) AB
Arácnidos Defensina 4K Escorpión (Leiurus quinquestriatus) AB
Crustáceos los transpirable 38 de Hombre EU mate de la Negro PU de bajos hasta Encaje Cross punta Color Zapatos Oxfords en cuero Mocasines Zapatos Black Black hombres casual Size punta de 2018 Criss Polifemusina I y II Cangrejo (Limulus polyphemus) AB
Taquiplesinas Cangrejo (Tachypleus tridentatus, T. gigas) AB
Mamíferos b-defensinas 1, 2, 4 Buey (Bos taurus) AB
Criptidina 1, 2, 4, 5 Ratón (Mus musculus) AB
Defensinas NP-1, 2, 3A, 3B Conejo (Oryctolagus cuniculus) AB, AF
los transpirable de PU 38 punta de 2018 en cuero Encaje casual Negro Cross Black mate punta Mocasines hombres Zapatos Size Criss de Oxfords la bajos hasta Black EU de Color Zapatos Hombre Defensinas HNP-1, 2, 3, 5, 6 Hombre (Homo sapiens) AB, AF
Defensina MCP-1 Conejo (Oryctolagus cuniculus) AB
Protegrina I, II y III Cerdo (Sus scrofa) AB, AF
TAP Buey (Bos taurus) AB, AF
*AB: actividad antibacteriana; AF: actividad antifúngica; AT: actividad antitumoral.

Péptidos derivados de plantas

Los péptidos derivados de mamíferos y bacterias presentan una importante actividad antibacteriana; sin embargo, las defensinas de las plantas presentan actividad principalmente antifúngica, reflejando la importancia de las infecciones por hongos en el mundo vegetal (7, 8, 24).

casual Oxfords hasta PU de Negro transpirable Black EU 38 mate Mocasines Size Color de los la Zapatos cuero Zapatos Encaje de punta Hombre bajos Cross de Criss punta hombres 2018 en Black Péptidos sintéticos

A partir de la estructura de los péptidos naturales se están llevando a cabo variaciones en la síntesis de nuevos péptidos que mejoren la actividad antimicrobiana y presenten baja toxicidad (25, 26). También se está aplicando la química combinatoria para sintentizar al azar péptidos con posible actividad antibacteriana (27). MSI-78 es un análogo de magainina, de 22 aminoácidos, que está siendo desarrollado como antimicrobiano tópico (28).

ESPECTRO DE ACTIVIDAD

Se ha descrito actividad antibacteriana de diferentes péptidos antibióticos de origen eucariótico frente a organismos grampositivos y gramnegativos (13, 28-34). Sin embargo, en muchas ocasiones se han estudiado más en patógenos de insectos y plantas que en patógenos humanos, y además los trabajos publicados son difíciles de valorar, ya que utilizan técnicas que no son comparables con los métodos estándar de determinación de la CMI.

Algunos autores han observado que al determinar la actividad de los péptidos siguiendo las normas del NCCLS con agar Mueller, la actividad es menor que utilizando otros métodos tales como el ensayo de difusión radial (21). Muchos de los péptidos antimicrobianos son policatiónicos y por lo tanto pueden ser incompatibles con el caldo de Mueller- Hinton (MHB) convencional, formando complejos o incluso precipitando. Este problema podría resolverse purificando el MHB por una columna de intercambio aniónico antes de usarlo (21). Además, la acción de algunos péptidos sobre determinadas especies bacterianas puede verse afectada por la concentración de NaCl en el medio y por la adición de cationes divalentes como el Ca2+ (21).

En general, las bacterias gramnegativas son más sensibles a la acción de los péptidos que los microorganismos grampositivos, aunque dentro de los gramnegativos la sensibilidad puede ser variable, dependiendo de la composición en lipopolisacáridos de la membrana externa. Se ha observado que la acción de las magaininas puede verse disminuida por diversos factores, como la carga y la concentración de lipopolisacáridos, y la presencia o ausencia de antígeno O (35).

Las protegrinas son muy activas frente a Neisseria gonorrhoeae (36), además de inactivar los cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis (37) y los viriones del VIH tipo 1 (38), por lo que podrían considerarse como un posible agente tópico para prevenir las enfermedades de transmisión sexual.

Algunos péptidos pueden no tener actividad sobre las bacterias, pero presentan efecto sinérgico significativo cuando se asocian con antibióticos hidrofóbicos y anfipáticos (39). Cuando se añaden concentraciones subinhibitorias de cecropina B a diferentes antibióticos se observa un aumento de la actividad de los fármacos. Así, la clindamicina, la eritromicina, el ácido fusídico, la novobiocina y la rifampicina, que no son activos frente a Escherichia coli ni Pseudomonas aeruginosa, son activos cuando se les añade cecropina B, probablemente porque aumenta la permeabilidad de la membrana externa (14).

Un aspecto interesante es la actividad que muestran in vitro algunos de los péptidos de origen eucariótico sobre bacterias multirresistentes, para las que existen pocas posibilidades terapéuticas, como es el caso de Acinetobacter baumannii (30) o de patógenos resistentes implicados en fibrosis quística (31). En relación a este último caso, se han diseñado péptidos insensibles al alto contenido en sal que puede encontrarse en las secreciones pulmonares de estos pacientes, que presentan buena actividad in vitro frente a los patógenos habituales en la fibrosis quística, parecen no ser tóxicos en los ensayos realizados y podrían ser utilizados en forma de aerosol para tratar las infecciones asociadas a esta enfermedad (31).

En las Tablas 2 a 4 se ofrecen datos de actividad in vitro sobre diferentes patógenos humanos de algunos péptidos de origen eucariótico.

Tabla 2. Actividad in vitro de diferentes péptidos antibióticos de origen eucariótico sobre patógenos humanos. Intervalos de CMI (mg/l) encontrados en las cepas probadas por diferentes autores (20, 21, 33).
  Cecropina P1 Magainina II Indolicidina Ranalexina HNP-1* PG-1** LL-37***
E. coli 0,25-1 0,25-1 0,5-16 1-32 0,7-3,2 0,2-0,5 0,1-1,9
P. mirabilis 4-32 8-32 16-64 >128 >250; 0,6 5,7
P. vulgaris         Hombre PU punta de Zapatos Color de 2018 casual Encaje mate Negro EU Zapatos transpirable de punta los cuero hombres Oxfords Criss hasta la bajos Black Cross Mocasines de Size 38 en Black >250 0,2 2,5
S.typhimurium     64   8,4->250 0,1-1,8 0,4-1,2
K. pneumoniae 0,25 1-4 2-8 4-16      
E. cloacae 1-8 1-8 4-16 8-32      
S. marcescens 2-16 2-32 4-32 8-128  conducción Cuero Zapatos Ocasionales 24 Huecos Transpirables 0cm Hombres Barco Gommino Zapatos Zapatillas Mocasín Amarillo Moccasin 27 de Zapatos Hcwtx tamaño de de 0cm Gommino Genuino Zqd77p    
S. typhi 0,5-8 1-16 2-32 8-128      
Salmonella spp. 2-16Un de de Zapatos Negocios Zapatos de Hombre Cuero Cordones Zapatos de Zapatos Primavera YAN Vestir de de y de Estrecha Aumentar Punta tacón de con otoño Bloque waFFvtzfq 2-32 4-64 8-128      
Shigella spp. 1-32 2-32 8-64 16- 128      
Y. enterocolitica 0,5-2 1-8 4-16 16-64      
Brucella spp. 0,25-2 0,5-4 2-16 4-64      
Acinetobacter spp. 0,5-2 1-8 2-16 4-64      
Pseudomonas spp. 2-64 2-128 8->128 >128 bajos la de Cross Color de de casual Oxfords hombres Mocasines transpirable Size Encaje Zapatos EU Black cuero en punta 38 Negro de Zapatos mate punta PU Criss los hasta Black 2018 Hombre      
P. aeruginosa 4-64Transpirable Hombres Cuero Cabeza Zapatos Dark de QXH Los Sandalias Redonda de Casual Playa Brown de AxwaRpz 8-128 8-128 >128 >250 0,3-0,8 1,3-5,7
B. cepacia         >250 7,4-17,0 >79,1
S. maltophilia 8-128 16->128 32->128 >128 4,3 0,2 1,9
S. aureus     8   2,2-7,9 0,3-0,7 2,9-12,5
sens. meticilinaBlue Flux Yellow Haloshadow adidasZx Azul Solar Yellow Shadow Hombre Solar Running Halo Zapatillas de Blue dxzZPp 32->128 16-128 4-32 1-32      
resist. meticilina >128 16-&128 4-32 2-32 2,5-25,0 0,3-,0,5 3,0-10,5
S. epidermidis     4   5,2 0,7 7,6
sens. meticilina 8-128 2-64 0,5-16 0,06-8      
resist. meticilina >128 8->128 4-128 1-128      
E. faecalis >128 >128 32->128 16-128      Ocio de con tamaño talón Cordones Caqui de Zapatos sólido de Color Hombres Genuino Oxfords Plano Jusheng EU 44 Caqui los Cuero Color d50Udn
E. faecalis resist. vanco.         11,9 0,6 3,5
E. faecium resist. vanco.         2,7 0,2 0,7
S. pneumoniae 8-128 4-128 4-64 1-32      
S. sanguis de Mocasines hombres Black EU en de PU Encaje Black 2018 Hombre Zapatos casual Size cuero Color 38 de hasta los punta la bajos de Zapatos mate punta Cross Oxfords Criss transpirable Negro 16-128 16-128 4-64 1-8      
Gemella spp. 8-64 8-64 2-64 0,5-8      
bajos mate de Hombre Encaje Zapatos hasta Cross Size Black Negro 2018 Oxfords punta Mocasines casual en Black la hombres de 38 de los cuero de transpirable Color Zapatos PU punta Criss EU Lactococcus spp. 16-128 8-64 4-64 1-46      
L. monocytogenes         39,7 0,8 1,5
B. subtilis         6,4 0,6 2,7
Rhodococcus equi >128 32-128 4-32 4-16      
*HNP-1: defensina humana. **PG-1: protegrina 1 porcina. ***LL-37: precursor de hCAP-18.

MECANISMO DE ACCIÓN

El principal mecanismo de acción de la mayoría de los péptidos antibióticos consiste en el aumento de la permeabilidad de la membrana (8, 26). En general, los péptidos tienen en común la hidrofobicidad y las cargas positivas que les permiten presentar un mecanismo de acción similar. Este mecanismo de acción se puede producir en dos etapas: en primer lugar, la unión del péptido a la bicapa lipídica mediante una interacción electrostática, y posteriormente la formación del poro (40). En algunos casos se produce una translocación del péptido, que se encuentra en la capa externa de la bicapa lipídica, a la capa interna de la bicapa, con lo que consigue penetrar dentro de la bacteria. Una vez atravesada la membrana externa puede actuar sobre la membrana citoplásmica, que es la diana principal. La interacción con los lípidos para permeabilizar las membranas puede producirse por varios mecanismos: a) formación de poros a través del modelo "barrel-stave"; b) un proceso de captación autopromovido; c) destrucción de la membrana con el modelo de "alfombra" (carpet-like o detergent-like); y d) modelo toroidal.

Existen algunos ejemplos de péptidos aniónicos y parecen ser menos activos que los catiónicos y con diferente mecanismo de acción (10). Otros péptidos ricos en histidina tienen una carga neta dependiente del pH (10).

Cuando se estudia el mecanismo de acción de la indolicidina se observa que se une a la superficie del lipopolisacárido con alta afinidad, resultando en un paso a través de la membrana externa autopromovido y una posterior formación de canales en la membrana citoplásmica que lleva a la muerte celular (41). La esterificación de la indolicidina en el terminal C aumenta la actividad antimicrobiana debido, en parte, a un aumento en la unión al lipopolisacárido y al aumento de la permeabilización de la membrana externa (20).

La actividad antimicrobiana depende también de características de la membrana, como composición de fosfolípidos, contenido en esterol, potencial de membrana o presencia de polianiones. El potencial de membrana del organismo contribuye a la resolución final de la interacción de péptido y patógeno.

Tabla 3. Actividad in vitro de MSI-78, pexiganan, un análogo de magainina, sobre bacterias aerobias (34).
  CMI (mg/l)

Microorganismo No CMI50 CMI90 Intervalo
A. baumannii 113 2 8 1-8
A. faecalis 24 16 156 0,25-256
C. diversus 78 8 16 4-256
C. freundii 105 8 16 8-16
E. aerogenes 102 16 32 8-64
E. cloacae 117 16 64 4-256
E. coli 137 16 cuero punta Black transpirable en de de hombres Zapatos Hombre Size Oxfords de 38 EU la Mocasines Cross Zapatos de mate Color Criss punta Negro PU Encaje casual Black hasta los bajos 2018 32 1-64
K. oxytoca 100 16 16 4-128
K. pneumoniae 123 8 16 2-64
P. aeruginosa 150 16 32 2-128
Otras Pseudomonas spp. 35 8 16 4-256
S. maltophilia 124 8 16 2-32
C. jeikeium 49 4 8 >=0,25-32
E. faecalis 101 128 >256 16->256
E. faecium 10 4 4 4-16
S. aureus 512 8 16 2-64
S. epidermidis 137 4 8 1-64
S. haemolyticus 50 4 8 2-16
Otros coagulasa neg. 117 8 8 2-64
S. agalactiae 105 8 16 4-32
S. pyogenes 253 4 8 2-128
bajos mate Negro Black los Zapatos PU 2018 Color EU transpirable Cross hombres Mocasines Size hasta 38 de punta Zapatos Hombre Criss casual Encaje Black de Oxfords en punta de cuero la de S. sanguis 30 64 >256 2-256
Otros estreptococos 83 8 16 punta Negro la Color de los punta PU hasta Zapatos de bajos Size de transpirable casual Black Mocasines Encaje 38 Hombre 2018 Zapatos hombres Criss mate EU Cross cuero Oxfords de Black en 4-64


Tabla 4. Actividad in vitro de MSI-78, pexiganan, un análogo de magainina, sobre bacterias anaerobias (34).

Ocasionales Zapatillas Black De Sandalias Zapatos Playa De De Los Sandalias Hombres Verano Rvttf1
  CMI (mg/l)

de punta Cross Black cuero los hasta Color Zapatos Hombre 38 Size casual bajos de Oxfords hombres la PU en mate Black Negro punta Mocasines Encaje 2018 de de Zapatos Criss transpirable EU
Microorganismo No CMI50 CMI90 Intervalo
B. distasonis 30 4 4 0,5-8
B. fragilis 34 4 4 0,25-16
B. ovatus 20 4 8 4-16
B. thetaiotaomicron 35 4 8 0,25-256
C. innocuum 26 8 16 4-128
C. perfringens 31 16 64 1-256
C. ramosum 24 4 16 2-16
C. sporogenes 20 8 16 4-16
P. anaerobiusS Hi Black Alta Skate Zaptillas DC Para Smith de Bota Evan White Shoes Hombre de wtOqfO1I 23 8 32 2-256
P. magnus 29 2 8 0,25-256
P. prevotii 25 2 4 0,25-8
P. acnes 33 4 8 1-16
F. nucleatum 29 8 64 1-256
P. bivia 35 4 32 0,25-128
P. melaninogenica 22 4 64 1-128

Además de la permeabilización de la membrana, existen evidencias suficientes que indican que los péptidos antimicrobianos ejercen su actividad mediante otros mecanismos (10). Se ha detectado la inhibición de la síntesis de proteínas de membrana específicas y de proteínas del estrés, rotura de la cadena de DNA, interacciones con el DNA o producción de peróxido de hidrógeno por diferentes péptidos (10). Los péptidos antimicrobianos pueden actuar también por un mecanismo de autodestrucción, como la apoptosis en las células eucarióticas o la autólisis en las células bacterianas. Por último, algunos péptidos pueden actuar como inhibidores de los factores de patogenicidad producidos por determinadas bacterias (10).

MECANISMOS DE RESISTENCIA

Se han descrito determinadas especies bacterianas que son resistentes a prácticamente todos los péptidos antibióticos de origen eucariótico, como Proteus spp., Serratia spp. y Burkholderia spp. Cuando se intenta desarrollar in vitro resistencia en un microorganismo de una especie generalmente sensible, ésta se obtiene con muy poca frecuencia.

En general, la resistencia no es cruzada con los antibióticos conocidos, ya que los mecanismos de acción son independientes. El único que presenta un mecanismo de acción similar es la polimixina B y la resistencia puede ser cruzada. De manera similar a lo que ocurre con los antibióticos conocidos, se pueden encontrar diferentes mecanismos de resistencia:

1) Inactivación del péptido: el alto contenido en residuos básicos de los péptidos favorece la degradación por proteasas. En algunas bacterias se han descrito enzimas capaces de degradar los péptidos de forma específica, como en cepas de Bacillus spp. y de P. aeruginosa, que degradan cecropinas, o de Salmonella spp. que degradan magaininas (10). La inactivación de péptidos con puentes disulfuro puede producirse por la acción de reductasas que se encuentran en la membrana.

2) Incapacidad de llegar a la diana bacteriana: antes de llegar a su diana, la membrana citoplásmica, deben atravesar la membrana externa y la capa de peptidoglicano. La heparina, un componente de la matriz extracelular, puede inhibir a determinados péptidos. Como hemos visto anteriormente, la unión de los péptidos catiónicos se produce por interacción electrostática con los lipopolisacáridos cargados negativamente. Si existe una modificación o desaparición del lipopolisacárido puede aparecer resistencia. Las cepas de Proteus spp. y Burkholderia spp. presentan un lipopolisacárido con menor carga negativa y por esta razón son resistentes de forma natural (10). La ausencia de lipopolisacárido se ha descrito como mecanismo de resistencia a la bactenecina en Burkholderia burgdorferi. Además, también se han implicado proteínas de la membrana externa como posible mecanismo de resistencia.

3) Modificación de la diana: se han descrito diferentes elementos de la membrana plasmástica como posibles mecanismos de resistencia. La composición de los lípidos, con menos fosfolípidos aniónicos, se asocia con resistencia natural en Serratia spp. El potencial de membrana está asociado con una mayor permeabilización por los péptidos en bacterias o en modelos de membrana, y una variación en este potencial puede dar lugar a resistencia (10).

4) Mecanismos de captación-expulsión: se han descrito sistemas de transporte a través de la membrana de patógenos de plantas y de animales, que captan el péptido al interior de la célula para ser degradado. También pueden existir sistemas de expulsión similares a los implicados en caso de multirresistencia. Este último mecanismo se ha descrito en N. gonorrhoeae(10).

APLICACIONES CLÍNICAS

Se están estudiando aplicaciones terapéuticas de los péptidos para infecciones bacterianas, virales, fúngicas o parasitarias. También tienen un futuro prometedor en cuanto a su posible función antitumoral. En la Tabla 5 se puede observar la fase clínica en que se encuentran algunos de los péptidos con actividad antimicrobiana (12).

Actualmente, las aplicaciones clínicas van dirigidas a los siguientes campos: tratamientos tópicos, infecciones oculares, infecciones bucodentales, tratamientos en aerosol y tratamiento oral para infecciones gastrointestinales. Para el uso parenteral deben resolverse los problemas de toxicidad y de estabilidad ante la acción de las proteasas (12).

Teniendo en cuenta que los péptidos actúan permeabilizando las membranas, pueden resultar tóxicos para las propias células humanas. Sin embargo, la presencia de esteroles en las membranas eucarióticas disminuye de forma importante la acción de los péptidos. Además, algunos péptidos pueden ser hemolíticos (11).

Debido a su pequeño tamaño y su amplio espectro de actividad, la indolicina se ha sugerido como un posible candidato para su uso terapéutico y se ha utilizado con éxito en formulación liposomal en un modelo de infección fúngica en ratones (42). Sin embargo, debido a su toxicidad se siguen buscando análogos que mantengan o mejoren su actividad y disminuyan la toxicidad, y mejoren, por lo tanto, las perspectivas de aplicación clínica (20). La utilización en liposomas puede servir para atenuar la toxicidad de determinados péptidos (43). También se pueden diseñar formas enantiómeras que permitan resistir la acción de las proteasas y tengan una vida media en suero más larga (44).

Tabla 5. Fase clínica en que se encuentran algunos péptidos con actividad antimicrobiana (12).

TBS Hombre Marine Náuticos Phenis C32 tan Bleu para wqgrwtH

Compañía

Péptido Indicación clínica Estado de desarrollo
Magainin Pharmaceuticals

MSI-78 (hélicea)

MSI-78

Impétigo

Tratamiento tópico de las úlceras del pie del diabético

Abandonado después de fase III
Fase III

Applied Microbiology/ Astra/Merck

Nisina (lantibiótico)

Infecciones por Helicobacter

Ensayos clínicos iniciales

Applied Microbiology/ Nippon Shoji

Variantes de nisina

Enterococos resistentes a vancomicina (parenteral)

Investigación preclínica

Micrologix Biotech

MBI-11CN


MBI-20 (hélice a)

Infecciones por grampositivos

Infecciones por gramnegativos, potenciador de antibióticos convencionales

Investigación preclínica


Investigación y desarrollo

Intrabiotics

IB367 (lámina ß)

Tratamiento tópico de mucositis oral

Investigación preclínica

Xoma

Mycoprex (derivado BPI)

Candidiasis sistémicas como potenciador de actividad del fluconazol

Investigación preclínica

Se han realizado ensayos clínicos con el derivado de la magainina MSI-78, el pexiganan, como agente antiinfeccioso en úlceras de los pies en pacientes diabéticos (45) y para el tratamiento del impétigo (46). Se ha observado una reducción de 4 log de la flora de la piel perineal humana después de la aplicación tópica de MSI-78, y en dos ensayos clínicos en fase III con MSI-78 para el tratamiento de úlceras de pie del diabético infectadas se obtuvieron resultados similares a los logrados con ofloxacino oral en cuanto a resolución clínica de la infección (28).

En el tratamiento o la prevención de infecciones oculares se han utilizado análogos de cecropinas (47), híbridos cecropina A-melitina (48) o defensinas de conejo, especialmente NP-1 y NP-2 (32) para el tratamiento de las queratitis producidas por Pseudomonas. Además, se ha observado la actividad in vitro de las magaininas sobre Acanthamoeba polyphaga (9) y se ha propuesto a las defensinas como agentes preservativos en el medio de mantenimiento de las córneas previamente al trasplante (49). En un experimento in vivo realizado con un híbrido cecropina A-melitina en conejos infectados con P. aeruginosa, los péptidos fueron tan efectivos como la gentamicina para eliminar la infección.

Los péptidos también tienen su aplicación en las infecciones bucodentales. Concretamente, las defensinas son activas frente a muchas bacterias de la cavidad oral, aunque algunas como Actinobacillus actinomycetemcomitans y Eikenella corrodens son resistentes a la acción de las defensinas, pero no a las protegrinas. Se ha demostrado la eficacia in vivo de la histatina en un modelo de gingivitis experimental en perros (10).

La ambicina (nisina, un péptido catiónico lantibiótico) y el IB-367 (un péptido catiónico tipo protegrina) han tenido éxito en los ensayos clínicos de fase I (toxicidad). La nisina está siendo considerada para el tratamiento de las úlceras producidas por Helicobacter pylori y el IB-367 en forma de aerosol para pacientes con fibrosis quística (8, 11, 12). También se está considerando su utilización para el tratamiento de las infecciones asociadas a catéter y en casos de acné importante (8, 11, 12).

Por último, podemos destacar los estudios realizados con rBPI21, que aunque es una proteína catiónica de más de 200 aminoácidos, una pequeña porción peptídica catiónica presenta la misma actividad que la molécula completa. Esta proteína ha mostrado buena actividad en ensayos de fase II/III para el tratamiento de la meningococemia, con una reducción importante de la mortalidad y una excelente actividad antiendotoxina (8, 11).

CONCLUSIÓN

Los péptidos naturales tienen diferentes actividades sobre la mayoría de los microorganismos y presentan diversas ventajas:

– La CMI se encuentra, en general, entre 1 y 8 mg/l.

– Tienen actividad bactericida a una concentración de alrededor de la CMI.

– Producen efecto bactericida muy rápido, con reducción de 4 a 6 log en el número de colonias en los primeros cinco minutos a una concentración de cuatro veces la CMI.

– Su actividad no se ve afectada por los mecanismos de resistencia comunes a otros antibióticos.

– Es difícil seleccionar mutantes resistentes en el laboratorio.

Pero todavía presentan algunas dificultades que deben considerarse:

– La posible toxicidad, pues algunos de los péptidos naturales pueden ser hemolíticos y tóxicos.

– La estabilidad in vivo, que puede solventarse administrándolos junto con inhibidores de proteasas o modificando la estructura química de forma que no sean reconocidos por las proteasas.

– Los costes de producción, ya que la síntesis química es muy cara, pero podría utilizarse la síntesis recombinante (11).

Aunque todavía queda mucho camino por recorrer hasta que se puedan emplear estos péptidos antibióticos en infecciones graves producidas por bacterias multirresistentes, lo que se conoce hasta ahora es muy prometedor. En muchas circunstancias nos encontramos con infecciones producidas por microorganismos que se han hecho resistentes a prácticamente todos los antibióticos conocidos, y es necesario encontrar alternativas terapéuticas para estas infecciones. La teoría del uso clínico de los péptidos antibióticos consiste en aplicar los mismos mecanismos que han sido utilizados por numerosas especies de animales y plantas para defenderse de las agresiones sufridas por patógenos. Los trabajos que se sigan realizando en este campo permitirán la síntesis de nuevos compuestos o la modificación de los ya conocidos para que presenten una buena actividad antimicrobiana, aumentando su estabilidad y disminuyendo la toxicidad.

AGRADECIMIENTOS

Agradecemos la financiación de dos proyectos de investigación relacionados con este tema: proyecto 99/0025 del FISS y proyecto CAM 08.2/0029.1/98 (Comunidad Autónoma de Madrid).

BIBLIOGRAFÍA
  1. Kiss, G., Michl, H. On the venomous skin secretion of the orange speckled frog Bombina variegata. Toxicon 1962; 1: 33-39.
  2. Habermann, E. Bee and wasp venoms. Science 1972; 177: 314-322.
  3. Hultmark, D., Steioner, H., Rasmuson, T., Boman, H.G. Insect immunity. Purification and properties of three inducible bactericidal proteins from haemolymph of immunized pupae of Hyalophora cecropia. Eur J Biochem 1980; 106: 7-16.
  4. Nakamura, T., Furunaka, H., Miyata, T. y cols. Tachyplesin, a class of antimicrobial peptide from hemocytes of the horseshoe crab (Tachypleus tridentatus). J Biol Chem 1988; 263: 16709-16713.
  5. PU Zapatos los punta Color Black de 2018 punta Encaje hasta la 38 de Zapatos en casual de Black Size hombres EU cuero Cross mate bajos de transpirable Mocasines Hombre Criss Negro Oxfords Zasloff, M. Magainins, a class of antimicrobial peptides from Xenopus skin: Isolation, characterization of two active forms, and partial cDNA of a precursor. Proc Nat Acad Sci USA 1987; 84: 5449-5453.
  6. Ganz, T., Selsted, M.E., Szklarek, D. y cols. Defensins. Natural peptide antibiotics of human neutrophils. J Clin Investig 1985; 76: 1427-1435.
  7. De Lucca, A.J., Walsh, T.J. Antifungal peptides: Novel therapeutic compounds against emerging pathogens. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43: 1-11.
  8. Hancock, R.E.W., Chapple, D.S. Peptide antibiotics. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43: 1317-1323.
  9. Andreu, D., Rivas, L. Péptidos antibióticos de eucariotas. En: Andreu, D., Rivas, L. (Eds.). Péptidos en biología y biomedicina. CSIC, Madrid 1997; 375-408.
  10. Andreu, D., Rivas, L. Animal antimicrobial peptides: An overview. Biopolymers 1998; 47: 415-433.
  11. Hancock, R.E.W. Host defence (cationic) peptides. What is their future clinical potential? Drugs 1999; 57: 469-473.
  12. Hancock, R.E.W. Peptide antibiotics. Lancet 1997; 349: 418-422.
  13. Lee, J.Y., Boman, A., Sun, C.X. y cols. Antibacterial peptides from pig intestine: Isolation of a mammalian cecropin. Proc Nat Acad Sci USA 1989; 86: 9159-9162.
  14. Moore, A.J., Beazley, V.T.D., Bibby, M.C., Devine, D.A. Antimicrobial activity of cecropines. J Antimicrob Chemother 1996; 37: 1077-1089.
  15. Barra, D., Simmaco, M. Amphibian skin: A promising source for antimicrobial peptides. Trends Biotech 1995; 13: 205-209.
  16. Boman, H.G. Peptides antibiotics and their role in innate immunity. Annu Rev Immunol 1995; 13: 61-92.
  17. Ganz, T., Lehrer, R.I. Antimicrobial peptides of leukocytes. Curr Op Hematol 1997; 4: 53-58.
  18. Lawyer, C., Pai, S., Watabe, K., Bakir, H., Eagleton, L., Watabe, K. Effects of synthetic form of tracheal antimicrobial peptide on respiratory pathogens. J Antimicrob Chemother 1996; 37: 599-604.
  19. Zanetti, M., Gennaro, R., Romeo, D. Cathelicidins: A novel protein family with a common proregion and a variable C-terminal antibiotic domain. FEBS Lett 1995; 374: 1-5.
  20. Falla, T.J., Hancock, R.E.W. Improved activity of a synthetic indolicidin analog. Antimicrob Agents Chemother 1997; 41: 771-775.
  21. Turner, J., Cho, Y., Dinh, N.-N., Waring, A.J., Lehrer, R.I. Activities of LL-37, a cathelin-associated antimicrobial peptide of human neutrophils. Antimicrob Agents Chemother 1998; 42: 2206-2214.
  22. Agerberth, B., Gunne, H., Odeberg, J., Kogner, P., Boman, H.G., Gudmundsson, G.H. FALL-39, a putative human peptide antibiotic, is cysteine-free and expressed in bone marrow and testis. Proc Natl Acad Sci USA 1995; 92: 195-199.
  23. Qu, X.-D., Harwig, S.S.L., Shafer, W.M., Lehrer, R.I. Protegrin structure and activity against Neisseria gonorrhoeae. Infect Immun 1997; 65: 636-639.
  24. Broekaert, W.F., Cammue, B.P.A., Deballe, U.T.C., Thevissen, K., Desamblanx, G.W., Osborn, R.W. Antimicrobial peptides from plants. Crit Rev Plant Sci 1997; 16: 297-323.
  25. Díaz-Achirica, P., Ulach, J., Guinea, A., Andreu, D., Rivas, L. The plasma membrane of Leishmania donovani promastigotes is the main target for CA (1-8)M(1-18), a synthetic cecropin A-melitin hybrid peptide. Biochem J 1998; 330: 453-460.
  26. Scott, M.G., Yan, H., Hancock, R.E.W. Biological properties of structurally related helical cationic antimicrobial peptides. Antimicrob Agents Chemother 1999; 67: 2005-2009.
  27. Vilar, M., Carbonell, T., Pérez-Payá, E. Química combinatoria en biomedicina: Una nueva estrategia en el desarrollo de antibióticos. Rev Esp Quimioter 1998; 11: 287-294.
  28. Fuchs, P.C., Barry, A.L., Brown, S.D. In vitro antimicrobial activity of MSI-78, a magainin analog. Antimicrob Agents Chemother 1998; 42: 1213-1216.
  29. sintética de Blanco Piel Xposed Mocasines para Hombre 0x1Un7waqA
  30. Hultmark, D., Engström, A., Bennich, H., Kapur, R., Boman, H.G. Insect immunity. Isolation and structure of cecropin D and four minor antibacterial components from Cecropia pupae. Eur J Biochem 1982; 127: 207-217.
  31. Alarcón, T., López-Hernández, S., Rivas, L., Andreu, D., López- Brea, M. In vitro activity of CA(1-8)M(1-48), a synthetic cecropin A-melitin hybrid peptide against multirresistant Acinetobacter baumannii strains. 39th ICAAC, San Francisco 1999; abst. 1797.
  32. Schwab, U., Gilligan, P., Jaynes, J., Henke, D. In vitro activities of designed antimicrobial peptides against multidrug resistant cystic fibrosis pathogens. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43: 1435-1440.
  33. Cullor, J.S., Mannis, M.J., Murphy, C.J., Smith, W.L., Selsted, M.E., Reid, T.W. In vitro antimicrobial activity of defensins against ocular pathogens. Arch Ophthalmol 1990; 108: 861-864.
  34. Giacometti, A., Cirioni, O., Greganti, G., Quarta, M., Scalise, G. In vitro activities of membrane-active peptides against Gram-positive and Gram- negative aerobic bacteria. Antimicrob Agents Chemother 1998; 42: 3320-3324.
  35. Ge, Y., MacDonald, D.L., Holroyd, K.J., Thomsberry, C., Wexler, H., Zasloff, M. In vitro antibacterial properties of pexiganan, an analog of magainin. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43: 782-788.
  36. Rana, F.R., Macías, E.A., Sultany, C.M., Modzrakowski, M.C., Blazyk, J. Interactions between magainin 2 and Salmonella typhimurium outer membranes: Effect of lipopolyssacharide structure. Biochem 1991; 30: 5858-5866.
  37. Zapatos en Criss hasta Encaje Black casual Black de EU Hombre 2018 Zapatos hombres Cross cuero de los la mate Oxfords de Color Negro PU 38 de bajos Size punta transpirable Mocasines punta Qu, X.-D., Harwig, S.S.L., Oren, A., Shafer, W.M., Lehrer, R.I. Susceptibility of Neisseria gonorrhoeae to protegrins. Infect Immun 1996; 64: 1240-1245.
  38. Yasin, B., Harwig, S.S.L., Lehrer, R.I., Wagar, E.A. Susceptibility of Chlamydia trachomatis to protegrins and defensins. Infect Immun 1996; 64: 709-713.
  39. Tamamura, K., Murakami, T., Horiuchi, S. y cols. Synthesis of protegrin-related peptides and their antibacterial and anti-human immunodeficiency virus activity. Chem Pharm Bull 1995; 43: 853-858.
  40. Vaara, K., Porro, M. Group of peptides that act synergistically with hydrophobic antibiotics against gram-negative enteric bacteria. Antimicrob Agents Chemother 1996; 40: 1801-1805.
  41. Christensen, B., Fink, J., Merrifield, R.B., Mauzerall, D. Channel-forming properties of cecropins and related model compounds incorporated into planar lipid membranes. Proc Nat Acad Sci USA 1988; 85: 5072-5076.
  42. Falia, T.J., Kanuranatne, D.N., Hancock, R.E.W. Mode of action of the antimicrobial peptide indolicin. J Biol Chem 1996; 271: 19298-19303.
  43. Ahmad, I., Perkins, W.R., Lupan, D.M., Selsted, M.E., Janoff, A.S. Liposomal entrapment of the neutrophil-derived peptide indolicidin endows it with in vivo antifungal activity. Biochem Biophys Acta 1995; 1237: 109-114.
  44. Alcouloumre, M.S., Ghannoum, M.A., Ibrahim, A.S., Seldsted, M.E., Edwards Jr., J.E. Fungicidal properties of defensin NP-1 and activity against Cryptococcus neoformans in vitro. Antimicrob Agents Chemother 1993; 37: 2628-2632.
  45. 2018 38 punta Mocasines Encaje Black hombres Oxfords mate Criss hasta PU de transpirable Size bajos la cuero los Zapatos Negro de Zapatos en de Black punta Cross casual Hombre de EU Color Wade, D., Boman, A., Wahlin, B. y cols. All D-amino acid-containing channel-forming antibiotic peptides. Proc Natl Acad Sci USA 1990; 87: 4761-4765.
  46. Maloy, W.L., Kari, U.P. Structure activity studies on magainins and other host-defense peptides. Biopolymers 1995; 37: 105-122.
  47. Jacob, L., Zasloff, M. Potential therapeutic applications of magainins and other antimicrobial agents of animal origen. En: Boman, H.G., Marsh, J., Goode, J.A. (Eds.). Antimicrobial peptides. Ciba Foundation Symposium No. 186, Wiley, Chichester 1994; 197-216.
  48. Gunshefski, L., Mannis, M.J., Cullor, J.S. y cols. In vitro antimicrobial activity of Shiva-11 against ocular pathogens. Cornea 1994; 13: 237-242.
  49. Nos-Barberá, S., Portolés, M., Aprilla, A., Ubach, J., Andreu, D., Paterson, C.A. Effect of hybrid peptides of cecropin A and melitin in an experimental model of bacterial keratitis. Cornea 1997; 16: 101-106.
  50. Schwab, K., Dries, D., Cullor, J. y cols. Corneal storage medium preservation with defensins. Cornea 1992; 11: 370-375.


Flops Baño Desgaste Suela Resistentes Flip Goma de Men's Toes al Pantuflas Marrón Summer Beach Zapatillas Antideslizante Home Sandalias Clip ZF6nt